Modelo animal de insuficiência hepática aguda induzida por d-galactosamina em ratos

Modelo animal de insuficiência hepática aguda induzida por d-galactosamina em ratos

Author Silva, Ligia Patricia de Carvalho Batista da Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Gonzalez, Adriano Miziara Gonzalez Autor UNIFESP Google Scholar
Institution Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Graduate program Ciência Cirúrgica Interdisciplinar
Abstract Objective: To describe an animal model for acute liver failure by administering intraperitoneal injections of d-galactosamine in mice and defining which is the best time to intervene in this model, through evaluation of the King?s College and Clichy criteria. Methods: Seventy-three female Wistar mice, weighing between 195 g and 251 g, were distributed into three groups: group 1 (11 animals received a dose of 1.4 g/kg of d-galactosamine intraperitoneally and were observed until death); group 2 (12 animals received 0,8g/Kg of d-galactosamine and were observed until death) group 3 (44 animals received a dose of 1.4 g/kg of d-galactosamine and blood and histological samples were collected for analysis 12 h, 24 h, 48 h, 72 h and 120 h after injection); and control group (composed of six animals). Samples of liver, heart, lung, brain, spleen, kidney and pancreas were removed for analysis. AST/ALT, Hb/Ht, albumin, PT, INR, factor V, aPTT, urea, creatinine and bilirubin (total and fractions) were analyzed in blood 12 h, 24 h, 48 h, 72 h and 120 h after injection of dgalactosamine. Results: Hemorrhagic suffusions, spasms, convulsion and hypoactivity were found. Twelve hours after injection of d-galactosamine, the values of AST/ALT, bilirubin, factor V, PT, INR and aPTT were already altered. They reaching their peak at 48 h and then decreased again after 72 h, to reach values that were practically normal at 120 h. INR > 6.5 was found 12 h after the injection and factor V < 30% after 24 h. All the laboratory variables presented statistical differences, except urea (p = 0.758) and Hb (p = 0.067). Intense necrosis, apoptosis, ballooning and bleeding were present at 24 h and 48 h after injection and improvement of these findings was found after 72 h with almost full recovery at 120 h. There were statistical differences between all the histological variables analyzed, except for portal infiltrate (p = 0.143). There was no evidence of significant injuries to other organs. The mortality rate was 73% (8 out of 11 animals) in group 1. The first death occurred 44 h after the injection and most deaths occurred between 49 h and 60 h (5 animals). Conclusion: The laboratory, clinical and histological findings, along with the mortality rate, reflected the severity of acute liver failure and were similar to the evolution of the disease in humans. Induction of acute liver failure by means of d-galactosamine seems to be a viable model for testing new therapeutic approaches. The King?s College and Clichy criteria were fulfilled 12 h after injection of d-galactosamine, which may represent the ideal time for testing the efficiency of new therapies.

Objetivo: Descrever um modelo animal de insuficiência hepática aguda através da administração intra-peritoneal de d-galactosamina em ratos e definir qual o melhor momento para intervir neste modelo através da avaliação dos critérios do King?s College e Clichy. Métodos: Setenta e três ratos, fêmeas, Wistar, pesando entre 195g-251g, foram distribuídos em quatro grupos: grupo 1 (11 animais receberam a dose de 1,4g/Kg de d-gal intraperitonealmente e foram observados até a morte); grupo 2 (12 animais submetidos a injeção i.p. de 0,8g/Kg de d-gal e foram observados até a morte); grupo 3 (44 animais receberam a dose de 1,4g/Kg de dgalactosamina e tiveram amostras sanguínea e histológica coletadas para análise 12h, 24h, 48h, 72h e 120h); grupo controle (composto por seis animais). Amostras do fígado, coração, pulmão, cérebro, baço, rim e pâncreas foram retirados para análise e AST/ALT, Hb/Ht, albumina, TP, INR, fator V, TTPa, uréia, creatinina e bilirrubina total e frações foram analisados no sangue 12h, 24h, 48h, 72h e 120h após injeção de d-galactosamina. Para comparar as variáveis numéricas utilizou-se o teste não paramétrico de Kruskal-Wallis e para avaliar a existência de associação entre as variáveis categóricas, utilizou-se o teste exato de Fisher. Resultados: Sufusões hemorrágicas, espasmos, convulsão e hipoatividade foram encontrados. Doze horas após a injeção de d-gal, valores de AST/ALT, bilirrubina, fator V, TP, INR e TTPa já estavam alterados alcançando um pico em 48h, voltando a cair após 72h e atingindo valores praticamente normais em 120h. INR > 6,5 é encontrado 12h após a injeção e fator V <30% após 24h. Todas as variáveis laboratoriais apresentaram diferenças estatísticas, exceto uréia (p = 0,758) e Hb (p = 0,067). Intensa necrose, apoptose, balonização e hemorragia estão presentes em 24h e 48h após a injeção e melhora desses achados se dar após 72h com recuperação quase completa em 120h. Houve diferença estatística entre todas as variáveis histológicas analisadas, exceto infiltrado portal (p = 0,143). Não houve evidência de lesões significativas em outros órgãos. Taxa de mortalidade foi de 73% (8 de 11 animais) no grupo 1. A primeira morte aconteceu 44h após a injeção e a maioria das mortes aconteceu entre 49h e 60h (5 animais). Conclusão: Os achados laboratoriais, clínicos e histológicos, assim como a taxa de mortalidade, refletem a gravidade da IHA. A indução de IHA por d-galactosamina parece ser um modelo viável para teste de novas abordagens terapêuticas. Os critérios de King?s College e Clichy são preenchidos após 12h da injeção de d-gal, e pode representar representar o momento ideal para se testar a eficácia de novas terapias.
Keywords acute liver failure
animal models
galactosamine
falência hepática aguda
modelos animais
galactosamina
Language Portuguese
Date 2015-06-24
Published in SILVA, Ligia Patricia de Carvalho Batista da. Modelo animal de insuficiência hepática aguda induzida por d-galactosamina em ratos. 2015. 41 f. Dissertação (Mestrado) - Escola Paulista de Medicina, Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP), São Paulo, 2015.
Research area Medicina
Knowledge area Ciências da saúde
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 41 p.
Origin https://sucupira.capes.gov.br/sucupira/public/consultas/coleta/trabalhoConclusao/viewTrabalhoConclusao.jsf?popup=true&id_trabalho=2412917
Access rights Closed access
Type Dissertation
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/46138

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