Análise comparativa de sequências relacionadas aos genes da superfamília de proteínas gp85/sialidases de Trypanosoma cruzi em outros tripanossomatídeos

Análise comparativa de sequências relacionadas aos genes da superfamília de proteínas gp85/sialidases de Trypanosoma cruzi em outros tripanossomatídeos

Alternative title Comparative analysis of sequences related to Trypanosoma cruzi gp85/sialidase protein superfamily in other trypanosomes
Author Baida, Renata Cristina Pardos Autor UNIFESP Google Scholar
Advisor Silveira, Jose Franco da Autor UNIFESP Google Scholar
Abstract As formas tripomastigotas de Trypanosoma cruzi, encontradas na corrente sanguinea do hospedeiro vertebrado ou no tubo digestivo de inseto vetor, expressam proteinas de superficie que estao envolvidas no reconhecimento e penetracao do parasita na celula hospedeira. A maioria dos genes que codificam estas proteinas que ja foram clonados pertence a superfamilia das gp85/sialidases e a familia das mucinas-like. Os membros da superfamilia das gp85lsialidases (Tc-85, gp85, gp9O, gp82, transialidase) sao caracterizados pela presenca de dois motivos de aminoacidos parcialmente conservados: o motivo subterminal (VTVxNVxLYNR) e o motivo Asp (SxDxGxTW). O estudo comparativo dos genes da superfamiiia das gp85/sialidases e sequencias relacionadas a estes genes em outros tripanossomatideos pode ajudar na determinacao das caracteristicas destas proteinas que contribuem para suas funcoes na interacao com as celulas do hospedeiro. No presente trabalho, nos mostraremos uma analise comparativa de sequencias relacionadas a superfamilia das gp85/sialidases em 6 generos de tripanossomatideos e em 10 especies de tripanossomas. Inicialmente, foram detectadas, atraves de hibridizacoes por dotblot, sequencias relacionadas aos genes da superfamilia das gp85/sialidases no DNA genomico de T rangeli, T rabinowitschae, T conorhini, T dionisii, T sp. 60, alem do DNA de T cruzi. Mesmo em condicoes baixas de estringencia, nao houve sinal de hibridizacao nos DNAs de T lewisi, T blanchardi, T brucei, T cyclops e T evansi, indicando que a superfamilia nao esta presente nestes tripanossomas. Para verificarmos se os tripanossomas que apresentaram sinal positivo possuiam copias completas dos genes da superfamilia das gp85/sialidases, foram sintetisados oligonucleotideos que correspondem a partes das sequencias dos genes transialidase (ts), gp82 e gp85 em reacoes de amplificacao por PCR. Uma fragmento ts foi amplificado nos isolados de T rangeli, dado confirmado atraves de sequenciamento. A analise da sequencia de nucleotideos revelou 95 por cento de identidade com a sequencia de T rangeli presente no GenBank. Em contraste, nos outros tripanossomas nao foi possivel amplificarmos fragmentos ts, indicando que o sinal positivo nas hibridizacoes era devido a presenca de formas truncadas do gene ts. Nao foi possivel amplificarmos fragmentos dos genes gp82 e gp85 nos tripanossomas estudados, pois mesmo utilizado-se diferentes pares...(au)
Keywords Trypanosomatina
Trypanosoma cruzi
Antígenos de superfície
Genes
Language Portuguese
Date 2000
Published in São Paulo: [s.n.], 2000. 82 p. ilustab.
Publisher Universidade Federal de São Paulo (UNIFESP)
Extent 82 p.
Access rights Closed access
Type Dissertation
URI http://repositorio.unifesp.br/handle/11600/17086

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